Originalni nau~ni rad Orig i nal sci en tific pa per GENOTIPSKA VARIJABILNOST SADR@AJA ULJA KOD P[ENICE Nikola Hristov, Novica Mladenov, Veselinka \uri}, Ankica Kondi}-[pika, Ana Marjanovi}-Jeromela, Nada Le~i} Institut za ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad Izvod: Nerafinisano ulje dobijeno iz p{eni~nih klica, predstavlja jedan od najbogatijih izvora vitamina E, A i D. Pored toga, odlikuje se i visokim sadr - `a jem proteina i lecitina. Veoma je dobar izvor masnih kiselina koje povoljno uti~u na pravilan razvoj organizma. Cilj ovog rada je bio da se utvrdi varijabilnost sadr`aja ulja u zrnu razli~itih sorti p{enice. Analiza je obuhvatila dvadeset fenotipski divergentnih genotipova iz razli~itih ciklusa selekcije. Kao uzorak za analizu kori{}en je omota~ p{eni~nog zrna (mekinjasti deo) dobijen u postupku mlevenja na laboratorijskom mlinu MLU 202. U mekinjastoj frakciji, pored omota~a nalazi se i p{eni~na klica koja je bogata uljem. Za utvr ivanje sadr`aja ulja primenjena je klasi~na metoda po Ru{kovskom. Utvr ene su zna~ajne razlike izme u genotipova pri ~emu se sadr`aj ulja kretao od 2.62% (Skopljanka) do 5.21% (Dragana). Primenom klaster analize izvr{eno je grupisanje prema stepenu sli~nosti. Velika varijabilnost izme u genotipova ukazuje na dalju mogu}nost unapre enja analiziranog svojstva. Klju~ne re~i: p{enica, ulje, varijabilnost Uvod Kvalitet p{enice je definisan velikim brojem parametara u zavisnosti od namene i na~ina prerade (Den~i} i sar., 2007). Sve ve}i zna~aj upotrebe p{eni~nog ulja u prehrambenoj i kozmeti~koj industriji, isti~e ovo svojstvo kao jedan od va`nih pokazatelja kvaliteta s obzirom na nutritivna i lekovita svojstva. P{eni~no ulje se mo`e vi{enamenski koristiti kao sastavni deo prehrambenih proizvoda, biolo{ki agens za kontrolu insekata, u farmaceutskoj i kozmeti~koj industriji (Kahlon, 1989). Visok sadr`aj tokoferola vitamina E (0.3 do 0.5%) i amino kiselina koje se ne sinteti{u u ljudskom organizmu, posebno ukazuju na vrednost p{eni~nog ulja i potrebu za detaljnijim istra`ivanjima. Prema Swern (1996), jedan kg ulja sadr`i oko 1179 mg -tokoferola, 398 mg -tokoferola, 493 mg -tkoferola i 118 mg -tokoferola. Vi ta min E uti~e na stabilnost }elijskih membrana, spre~avanjem cepanja nezasi}enih masnih kiselina. Zahvaljuju}i integralnoj ulozi u fosfolipidima na enim u }elijskim membranama, vi ta min E ima za{titnu ulogu svih }elija a posebno }elija sa kratkim periodom trajanja, kao {to su crvena i bela krvna zrnca i krvne plo~ice. Tako e, vi ta min E zaustavlja oksidativnu interakciju LDL holesterola, {to preventivno deluje na njegovo talo`enje na zidove arterija, ~ime spre~ava pojavu arteroskleroze. Vi ta min E doprinosi boljem usvajanju vitamina A i ima ulogu prekursora genitalnih hormona (Barnes, 1983). Osim tokoferola, ulje sadr`i i zna~ajan procenat nezasi}enih masnih kiselina. Sadr`aj linolne kiseline kre}e se od 44 do 65% a 5
6 Institut za ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad linoleinske 4 10%. Pored spomenutih komponenti, p{eni~no ulje sadr`i i neke druge prirodne agense koji su zna~ajni za obnavljanje }elija, prohodnost i kom - paktnost krvnih sudova i imunitet ~itavog organizma. Izdvajanje klice pri kori{}enju malog uzorka zrna, ograni~eno je tehni~kim mogu }nostima laboratorijskih mlinova. Zbog toga, sadr`aj ulja odre en u meki - nja stom delu zrna, indirektno ukazuje na potencijal analiziranog genotipa i mogu }nost dobijanja ve}e koli~ine ulja pri pa`ljivom odabiru materijala za preradu. Cilj ovog rada je bio da se utvrdi varijabilnost sadr`aja ulja u zrnu razli~itih sorti p{enice. Materijal i metod rada Kod dvadeset sorti ozime p{enice iz razli~itih ciklusa selekcije (Hristov et al., 2007), analiziran je sadr`aj ulja u toku 2007. godine. Ogled je izveden na lokalitetu Rimski [an~evi Novi Sad, po slu~ajnom blok sistemu u tri ponavljanja, pri ~emu je povr{ina osnovne parcele iznosila 5 m 2. Za mlevenje je kori{}en zbirni uzorak od 5 kg zrna iz sva tri ponavljanja, a za hemijsku analizu 20 g mekinjaste frakcije. Za utvr ivanje varijabilnosti analiziranog svojstva primenje - na je standardna analiza varijanse, a za grupisanje genotipova prema sli~nosti, primenjena je klaster analiza. S obzirom da se prilikom mlevenja zrna p{enice u laboratorijskom mlinu MLU 202, klica odvaja i najvi{e je zastupljena u mekinjastom delu, ova frakcija je poslu`ila za indirektno odre ivanje sadr`aja ulja, klasi~nom metodom po Ru{kovskom (1957). Rezultati i diskusija Analizirane sorte p{enice pokazale su zna~ajnu varijabilnost u sadr`aju ulja (Tab. 1). U razli~itim ciklusima selekcije kori{}ena je razli~ita germplazma roditeljskih komponenti, pre svega iz Rusije i Italije. Razli~itost materijala ispoljena na genetskom nivou i agroklimatska specifi~nost na{e zemlje, doprineli su stvaranju superiornih genotipova p{enice za uslove Srbije, pre svega u pogledu prinosa zrna. Moderno oplemenjivanje pored prinosa, obuhva - ta i kontinuirano unapre enje tehnolo{kog kvaliteta, a sadr`aj ulja u p{eni~nom zrnu postaje sve interesantniji za prera iva~ku industriju (Zacchi et al., 2006). Tab.1. Analiza varijanse za sadr`aj ulja u mekinjastom delu zrna p{enice Tab. 1. Anal y sis of vari ance of the oil con tent of wheat bran Izvor varijacije Source of vari a tion df MS F test Ponavljanje - Replication 2 0.09 Sorta - Va ri ety 19 1.69 13.08** Gre{ka - Error 38 0.13 Ukupno - To tal 59 Analizom svih ispitivanih sorti, utvr eno je da se prose~na vrednost sadr`aja ulja u mekinjastom delu zrna kretala od 2.62% (Skopljanka) do 5.21% (Dragana), pri ~emu je koeficijent varijacije (CV) iznosio 19,7%. Kod ~etiri sorte
Zbornik radova, Sveska 46, 2009. 7 sadr`aj ulja je bio <3%, kod osam sorti izme u 3 i 4%, kod 7 sorti izme u 4 i 5%, a samo kod jedne sorte preko 5% (Graf. 1). Klica ~ini 2 3% p{eni~nog zrna (Dunford and Zhang, 2003) i mo`e se relativno lako izdvojiti u veoma ~istom stanju, ali na mlinovima velike zapremine. Prose~an sadr`aj ulja u klici iznosi oko 11% (Sonntag, 1979), pri ~emu vrednosti mogu varirati od 8 do 14% (Megahad and Kinawy, 2002). Kod sorti priznatih u ranijim ciklusima selekcije (od sorte Libelula do sorte Renesansa), sadr`aj ulja se kretao u proseku oko 3.5%. Ta vrednost je sa izuzetkom nekoliko sorti (KG 56, Skopljanka i Lasta), odr`avana u du`em vremenskom periodu na ujedna~enom nivou (Graf. 1). Ukoliko bi se takav set genotipova koristio u programu unapre enja sadr`aja ulja, te{ko bi se postigao zna~ajniji uspeh. Razli~iti na~ini i tehnolo{ki procesi dobijanja p{eni~nog ulja u cilju o~uvanja prirodne vrednosti, jedan su od pravaca istra`ivanja. Me utim, kori{}enje p{eni~nih klica dobijenih iz velikih mlinarskih industrija (Megahad and Kinawy, 2002; Dunford and Zhang, 2003; Zacchi et al., 2006), onemogu}uje precizna istra`ivanja u pogledu geneti~ke divergentnosti i stvaranje genotipova sa pobolj{anim karakteristikama u pogledu na ovo svojtvo. Graf.1. Prose~an sadr`aj ulja u mekinjastom delu zrna p{enice Graph. 1. Av er age oil con tent of wheat bran Zahvaljuju}i sortama koje su kreirane u poslednjem ciklusu selekcije sa sadr`ajem ulja preko 4% (od sorte Pesma do sorte NS 40S), stvorena je divergentna genetska baza koja omogu}uje da se sadr`aj ulja pove}a i preko 5% (Graf. 1). S obzirom da je ta vrednost ve} ostvarena kod sorte Dragana, pa`ljivim prou~avanjem i kombinacijom geneti~kog backgrounda (Hristov et al., 2007), olak{a}e se stvaranje superiornih sorti u pogledu ovog svojstva. Izuzetno krupno zrno koje poseduje sorta Dragana (Mladenov i sar., 2008), verovatno je uticalo i na veli~inu klice, koja je kod p{enice znatno manja u odnosu na zrno kukuruza (Jellum and Widstrom, 1983). Ukoliko se u budu}im istra`ivanjima utvrdi zna~ajna korelacija izme u krupno}e zrna i veli~ine klice, pored pove}anja sadr`aja ulja u klici, selekcijom sorti sa krupnijim zrnom, zna~ajno bi se pove}ao i prinos ulja po jedinici povr{ine.
8 Institut za ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad Graf. 2. Klaster analiza za sadr`aj uja u mekinjastom delu zrna p{enice Graph. 2. Clus ter anal y sis of oil con tent in wheat bran Primena klaster analize omogu}uje prikaz sli~nosti i razlika izme u pojedinih genotipova u zavisnosti od svojstva koje se analizira (Choudhary and Joshi, 2001). Genotipovi sa sli~nom reakcijom svrstavaju se u klastere, a podaci se mogu sumirati i znatno lak{e analizirati (de Oliveira et al., 2003). Dendrogram analiziranih genotipova za sadr`aj ulja podeljen je u tri velike grupe. Prvu grupu sa~injava jedna podgrupa sa izuzetno visokim sadr`ajem ulja i zasebna sorta Dragana, sa najve}om prose~nom vredno{}u analiziranog svojstva. Drugu grupu sa dve podgrupe ~ine sorte sa sadr`ajem ulja iznad proseka. Prva i druga grupa spajaju se na vi{em hijerarhijskom nivou, {to ukazuje na njihovu me usobnu sli~nost. Poslednju grupu, sa dve podgrupe, predstavljaju genotipovi sa sadr`ajem ulja ispod proseka (Graf. 2). S obzirom na hijerarhijski nivo spajanja grupa, jasno se vidi da se u tre}oj grupi nalaze sorte sa najskromnijim potencijalom za unapre enje sadr`aja ulja i od njih ne bi trebalo puno o~ekivati u daljem radu. Spajanje prve i druge grupe sa tre}om, na izuzetno visokom hijerarhijskom nivou, ukazuje na velike me usobne razlike i varijabilnost analiziranih sorti Zaklju~ak Prose~na vrednost sadr`aja ulja u mekinjastom delu zrna kretala od 2.62% (Skopljanka) do 5.21% (Dragana). Utvr ena je zna~ajna varijabilnost kod ispiti - vanih sorti (CV=19.7%), {to predstavlja va`an preduslov za dalji napredak u oplemenjivanju. Primenom klaster analize genotipovi su grupisani prema sli~nosti, {to }e umnogome olak{ati izbor roditeljskih parova za unapre enje ovog svojstva. Neophodno je detaljnije analizirati korelativne odnose sadr`aja ulja i drugih karakteristika zrna. U narednom periodu trebalo bi pove}ati broj
Zbornik radova, Sveska 46, 2009. 9 analiziranih genotipova i time pro{iriti geneti~ku osnovu za intezivniji rad na ve}em sadr`aju ulja. Literatura Barnes, R.J. (1983): Wheat germ oil in lipid in ce real tech nol ogy. Edite by P.J. Barnes, Ac a - demic Press, New York. Choudhary, B. R., Joshi, P. (2001): Ge netic di ver sity in ad vanced de riv a tives of Brassica interspecific hy brids. Euphytica, 121, 1-7. Dencic, S., Kobiljski, B., Mladenov, N., Hristov, N., Pavlovic, M. (2007): Long term breed ing for bread mak ing qual ity in wheat. De vel op ments in Plant Breed ing - Wheat Pro duc - tion in Stressed En vi ron ments, Buck, H.T.; Nisi, J.E.; Salomón, N. (Eds.), Vol. 12, 495-502. de Oliveira, A.B., Duarte, J.B., Pinheiro, J.B. (2003): Ap pli ca tion of AMMI anal y sis in the as - sess ment of yield sta bil ity in soy bean. Pesqui Agropescu Bras., 38(3), 357-364. Dunford, T.N. and Zhang, M.(2003): Pres sur ized sol vent ex trac tion of wheat germ oil. Food Research International, 36, 905-909. Hristov, N., Mladenov, N., \uric, Veselinka, Kondic-Spika, Ankica (2007): Ad vances in im - provement of technological quality of wheat in Republic of Serbia. I International con - gress Food Tech nol ogy, Qual ity and Safety / XVI Sym po sium Ce real-bread and Con - fec tion ery Prod ucts, Nov. 13-15, Novi Sad. Poceedings, 216-224. Jellum, D. M. and Widstrom, W. N. (1983): In her i tance of stearic acid in germ oil of the maize ker nel. The Jour nal of He red ity, 74(5), 383-384 Kahlon, T.S. (1989): Nu tri tional im pli ca tions and uses of wheat and oat ker nel oil. Ce real Foods World, 34, 872-875. Megahad, A. O. and El Kinawy, S.O. (2002): Stud ies on the ex trac tion wheat germ oil by com mer cial hex ane Grasas y Aceites, 53(4), 414-418. Mladenov, N., Hristov, N., Male{evi}, M., Mladenovi}, G., Kova~evi}, N. (2008): Dragana nova sorta ozime p{enice. Zbornik radova, Institut za ratarstvo i povrtarstvo Novi Sad, 45, II, 5 14. Ru{kovskiy, S.V. (1957): Metodà issledovaniô pri selekcii masli~nã h rasteniy na soder`anie masla i ego ka~estvo. Priçepromizdat, Moskva. Sonntag, N.O.V. (1979): Com po si tion and char ac ter is tics of in di vid ual fats and oils. In D. Swern (Ed.), Bailey s in dus trial oil and fat prod ucts, New York: John Wiley & Sons, 1, 284-477. Swern, D. (1996): Bailey s in dus trial oil and fat prod ucts. Fift edi tion, Vol. 4. Zacchi, P., Daghero, J., Jae ger, P. Egg ers, R. (2006): Ex trac tion/frac tion ation and deacidifi - cation of wheat germ oil us ing super criti cal car bon di ox ide. Bra zil ian Jour nal of Chemical Engineering, 23(01), 105-110.
10 Institut za ratarstvo i povrtarstvo, Novi Sad GENOTYPIC VARIATION OF GERM OIL CONTENT IN WHEAT Nikola Hristov, Novica Mladenov, Veselinka \uri}, Ankica Kondi}-[pika, Ana Marjanovi}-Jeromela, Nada Leci} In sti tute of Field and Veg e ta ble Crops, Novi Sad Sum mary: Wheat germ oil is a highly rich un re fined oil that is one of the rich est sources of Vi ta min E, A and D. It also has a high con tent of pro teins and Lec i thin. It is a good source of fatty ac ids that are very vi tal for the healthy growth of the body. The ob jec - tive of this pa per was to de ter mine the vari abil ity of grain oil con tent in twenty pheno - typically di ver gent wheat va ri et ies from dif fer ent se lec tion cy cles. Anal y sis was con ducted on the bran por tion of the wheat grain. The bran frac tion of wheat in cor po rates the germ, which is rich in oil. It was ob tained us ing the lab o ra tory mill MLU 202. Oil con tent was de - ter mined us ing the clas si cal method de vel oped by Ruskovski. Sig nif i cant dif fer ences were found among the ge no types, with the oil con tent rang ing from 2.62% (Skopljanka) to 5.21% (Dragana). Clus ter anal y sis was used to sort the ge no types ac cord ing to the de gree of sim i lar ity. The large vari abil ity among the ge no types re vealed by the study in di cates the pos si bil ity for a fur ther im prove ment of the tested trait. Key words: germ, wheat, oil, va ri ety, vari abil ity