Биолошки факултет Број захтева:33/143-1 Датум: 13.07.2016. УНИВЕРЗИТЕТ У БЕОГРАДУ ВЕЋУ НАУЧНИХ ОБЛАСТИ ПРИРОДНИХ НАУКА З А Х Т Е В за давање сагласности на предлог теме докторске дисертације за кандидата на докторским студијама Молимо да, сходно члану 47. ст. 5. тач. 3. Статута Универзитета у Београду ("Гласник Универзитета", број 162/11-пречишћени текст, 167/12, 172/13 и 178/14), дате сагласност на предлог теме докторске дисертације: Морфолошка и молекуларна карактеризација хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација и испитивање изолованих мезенхимских ћелија in vitro НАУЧНА ОБЛАСТ: Биолошке науке. ПОДАЦИ О КАНДИДАТУ: 1. Име, име једног родитеља и презиме кандидата: Сања Т. Стојановић 2. Претходно образовање (назив и седиште факултета, студијски програм): Универзитет у Нишу Медицински факултет 3. Година дипломирања: 2012. 4. Година уписа на докторске студије: 2012/2013. Универзитет у Београду-Биолошки факултет 5. Назив студијског програма докторских студија: Биологија, модул: Биологија ћелије и ткива.
ПОДАЦИ О МЕНТОРУ А: Име и презиме: др Стево Најман Звање: редовни професор, Универзитет у Нишу-Медицински факултет Списак радова који квалификују ментора за вођење докторске дисертације: 1. Stojanović S, Najman S. Мacrophages - Тhe Кey Аctors in Аdipose Тissue Remodeling and Dysfunction. In: Najman S (editor). Cell Biology - New Insights. InTech; 2016. DOI: 10.5772/59649. 2. Cvetković V, Najdanović J, Vukelić-Nikolić M, Stojanović S, Najman S. Osteogenic potential of in vitro osteoinduced adipose-derived mesenchymal stem cells combined with platelet-rich plasma in ectopic model". International Orthopaedics 2015; 39(11):2173-2180. 3. Najdanović J, Cvetković V, Stojanović S, Vukelić-Nikolić M, Stanisavljević M, Živković J, Najman S. The Influence of adipose-derived stem cells induced into endothelial cells on ectopic vasculogenesis and osteogenesis. Cellular and Molecular Bioengineering 2015; 8(4):577-590. 4. Živković J, Najman S, Vukelić M, Stojanović S, Aleksić M, Stanisavljević M, Najdanović J. Osteogenic effect of inflammatory macrophages loaded onto mineral bone substitute in subcutaneous implants. Archives of biological sciences 2015; 67(1):173-186. 5. Lazarevic GD, Milojkovic M, Tasic IS, Najman SJ, Antic SS, Stefanovic VB. PC-1 (ENPP1) K121Q polymorphism in overweight and obese type 2 diabetic coronary heart disease patients. Acta Cardiologica 2008; 63(3):323-330.
Б: Име и презиме: др Александра Кораћ Звање: редовни професор, Универзитет у Београду-Биолошки факултет Списак радова који квалификују ментора за вођење докторске дисертације: 1. Jankovic A, Korac A, Buzadzic B, Stancic A, Otasevic V, Ferdinandy P, Daiber A, Korac B. (2016) Targeting the nitric oxide/superoxide ratio in adipose tissue: relevance in obesity and diabetes management. Br J Pharmacol. 2016 Apr 13. doi: 10.1111/bph.13498. 2. Janković A, Golić I, Markelić M, Stančić A, Otašević V, Buzadžić B, Korać A, Korać B. (2015) Two key temporally distinguishable molecular and cellular components of white adipose tissue browning during cold acclimation. J Physiol London, 15, 3267-3280. 3. Veličković K, Čvoro A, Srdić B, Stokić E, Markelić M, Golić I, Otašević V, Stančić A, Janković A, Vučetić M, Buzadžić B, Korać B, Korać A. (2014) Expression and subcellular localization of estrogen receptors α and β in human fetal brown adipose tissue. J Clin Endocrinol Metab, 99, 151-159. 4. Janković A, Korać A, Srdić-Galić B, Buzadžić B, Otašević V, Stančić A, Vučetić M, Markelić M, Veličković K, Golić I, Korać B. (2014) Differences in the redox status of human visceral and subcutaneous adipose tissue - relationship to obesity and metabolic risk. Metabolism, 63, 661-671. 5. Srdić B, Stokić Е, Korać A, Ukropina M, Veličković K, Breberina M. (2010) Morphological Characteristics of Abdominal Adipose Tissue in Normal-Weight and Obese Women of Different Metabolic Profiles. Exp Clin Endocrinol Diabetes, 118, 713-718. У случају менторства дисертације на докторским студијама у групацији техничкотехнолошких, природно-математичких и медицинских наука ментор треба да има најмање три рада са SCI, SSCI, AHCI или SCIе листе, као и Math-Net.Ru листе.
У случају менторства дисертације на докторским студијама у групацији друштвенохуманистичких наука ментор треба да има најмање три рада са релеватне листе научних часописа (Релевантна листа научних часописа обухвата SCI, SSCI, AHCI и SCIе листе, као и ERIH листу, листу часописа које је Министарство за науку класификовало као М24 и додатну листу часописа, коју ће на предлог Универзитета донети Национални савет за високо образовање. Посебно се вреднују и монографије које Министарство науке класификује као М11, М12, М13, М14, М41, и М51.) Обавештамо вас да је Наставно-научно веће Универзитета у Београду-Биолошког факултета, на седници одржаној 13.07.2016. год. размотрило предложену тему и закључило да је тема подобна за израду докторске дисертације јер садржи оригиналну идеју и да је од значаја за развој науке, примену њених резултата, односно развој научне мисли уопште. Декан Биолошког факултета Проф. др Жељко Томановић Прилог: 1. Предлог теме докторске дисертације са образложењем. 2. Акт надлежног тела факултета о подобности теме за израду докторске дисертације. 3. Електронска верзија 4. Потврда етичке комисије
33/143-13.07.2016. На основу члана 128. Закона о високом образовању и члана 59. став 1. тачка 12. Статута Биолошког факултета Универзитета у Београду, Наставно-научно веће Факултета, на IX редовној седници одржаној 13.07.2016. године, донело је О Д Л У К У Прихвата се Извештај Комисије за оцену испуњености услова и научне заснованости теме докторске дисертације кандидата: Сање Стојановић, магистар фармације, студијски програм Биологија, модул: Биологија ћелија и ткива, под називом: Морфолошка и молекуларна карактеризација хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација и испитивање изолованих мезенхимских ћелија in vitro За менторе се именују: 1. др Стево Најман, редовни професор, Универзитет у Нишу-Медицински факултет 2. др Александра Кораћ, редовни професор, Универзитет у Београду- Биолошки факултет Декан Биолошког факултета Доставити: - Универзитету у Београду, - докторанту, - ментору; - Стручној служби Факултета. Проф. др Жељко Томановић
НАСТАВНО НАУЧНОМ ВЕЋУ БИОЛОШКОГ ФАКУЛТЕТА УНИВЕРЗИТЕТА У БЕОГРАДУ На VIII редовној седници Наставно-научног већа Биолошког факултета Универзитета у Београду одржаној 10.06.2016. године, одређени смо у Комисију за оцену испуњености услова и научне заснованости предложене теме за израду докторске дисертације Сање Т. Стојановић, под насловом: Морфолошка и молекуларна карактеризација хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација и клиничких стања испитаника, и карактеризација изолованих мезенхимских ћелија in vitro. На основу поднете документације и увида у досадашњи рад Сање Стојановић, Комисија подноси Наставно-научном већу Биолошког факултета Универзитета у Београду следећи А. Биографија: Општи подаци: И З В Е Ш Т А Ј Име, средње слово и презиме: Сања Т. Стојановић Датум и место рођења: 12.03.1988, Ниш Образовање: Од 2012. Докторске академске студије, Биолошки факултет Универзитета у Београду, смер Биологија, модул Биологија ћелија и ткива 2012 Магистар фармације - Медицински факултет Универзитета у Нишу, одсек Фармација, просечна оцена 9,33 и оцена 10 на дипломском раду под називом Ефекат матичног млеча на пролиферацију MDCK ћелија у култури из предмета Биологија са хуманом генетиком Запослење: Од 2014. Истраживач сарадник за УНО Биологија, Медицински факултет, Универзитет у Нишу 2012-2014 Истраживач-приправник, Медицински факултет, Универзитет у Нишу Курсеви: Усавршавања у иностранству Istraživački boravak u FORM laboratoriji i obuka za rad na skenirajućem mikroskopu Nikon eclipse Ni equipped with camera Nikon Digital Sight DS-Fi1 i u programu za analizu slike i histomorfometriju NIS-ELEMENT version 4 - Univerzitetska klinika Johann Wolfgang Goethe, Frankfurt am Main, Nemačka, 10-24. februar 2014. Research Exchange Programme of the IFMSA at the Department of Pathophysiology at Victor Babes University of Medicine and Pharmacy, Timisoara, Romania, 5-30 July 2010. Курсеви и континуиране едукације KME Principi dijagnostike naslednih bolesti - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 16. maj 2016. 1
DSP Chromatography Seminar and Workshops Event - Bringing You the Solution - Falkensteiner hotel, Beograd, 8. mart 2016. Обуке Kurs Matične ćelije - inžinjering i ćelijska terapija - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 13-17. maj 2013. Workshop Immune system modulation: protein and gene engineered chimeric molecules, Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 27-28. maj 2013. Akreditovan program kontinuirane edukacije Regenerativna medicina - primena IT i biotehnologija - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 15. decembar 2012. Akreditovan program kontinuirane edukacije Principi rаdа nа еkspеrimеntаlnim živоtinjаmа u biоmеdicinskim istrаživаnjimа - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 10. novembar 2012. Kurs Matične ćelije i savremena medicina - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 10-14. oktobar 2011. International Training Workshop on Medicinal plants and environmental health by Michigan State University, Institute of International Health Niš, Serbia, 7-10 March 2011. Obuka za eksperimentalni rad na laboratorijskim životinjama: sitnim glodarima i lagomorfima (prema preporukama FELASE), kategorija C - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 24.03.2015. Obuka za eksperimentalni rad na laboratorijskim životinjama prema preporukama Felasa (kategorija C) - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 24.03.2015. Obuka za rad na aparatu RTCA DP Instrument (Real Time Cell Analyzer) i u programu RTCA Software 1.2.1 - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 01-02. april 2014. Obuka za rad na aparatu BD LSRFortessa Analyzer i u programu BD FACS Diva 8 - Medicinski fakultet, Univerzitet u Nišu, 27-31. januar 2014. Пројекти: Национални пројекти: Од 2012. Пројекат Виртуелни коштано зглобни систем човека и његова примена у претклиничкој и клиничкој пракси (ев. број III 41017) који финансира Министарство просвете, науке и технолошког развоја Републике Србије Чланство у научним друштвима: Српско друштво за молекуларну биологију Materials Research Society of Serbia Антрополошко друштво Србије Српско керамичко друштво Страни језици: Енглески, немачки 2
Посебне активности и награде: Активности: 2016 Коментор једног рада презентованог на 57. Конгресу студената биомедицинских наука Србије 2015 Учешће у реализацији Студентског програма размене организованог од стране NiPSA-е, на Медицинском факултету Универзитета у Нишу 2015 Учешће у реализацији Twin пројекта организованог од стране NiPSA-е, на Медицинском факултету Универзитета у Нишу 2009-2012 Демонстратор на предметима УНО Биологија, Медицински факултет Универзитета у Нишу Награде: 2015 Награда за најбољег истраживача на пројекту III 41017 ''Виртуелни коштано зглобни систем човека и његова примена у претклиничкој и клиничкој пракси, који финансира Министарство просвете, науке и технолошког развоја Републике Србије 2010 Награда за најбољег студента треће године фармације на Медицинском факултету у Нишу 2008 Награда за најбољег студента прве године фармације на Медицинском факултету у Нишу Стипендије 2010 2012 Стипендија града Ниша за талентоване ученике и студенте 2008 2009 Стипендија Министарства просвете Републике Србије Б. Библиографија: Б1. Поглавље у монографији међународног значаја - М14 1. Stojanović S, Najman S. Мacrophages - Тhe Кey Аctors in Аdipose Тissue Remodeling and Dysfunction. In: Najman S (editor). Cell Biology - New Insights. InTech; 2016. DOI: 10.5772/59649 Б2. Радови објављени у врхунским међународним часописима М21 1. Vuković JS, Babić MM, Antić KM, Filipović JM, Stojanović ST, Najman SJ, Tomić SLj. In vitro cytotoxicity assessment of intelligent acrylate based hydrogels with incorporated copper in wound management. Materials Chemistry and Physics 2016; 175:158 163. IF 2.259 2. Barbeck М, Najman S, Stojanović S, Mitić Ž, Živković JM, Choukroun J, Kovačević P, Sader R, Kirkpatrick CJ, Ghanaati S. Addition of blood to a phycogenic bone substitute leads to an increased in vivo vascularization. Biomedical materials 2015; 10(5):055007. IF 3.697 3
Б3. Радови објављени у истакнутим међународним часописима М22 3. Cvetković V, Najdanović J, Vukelić-Nikolić M, Stojanović S, Najman S. Osteogenic potential of in vitro osteoinduced adipose-derived mesenchymal stem cells combined with platelet-rich plasma in ectopic model". International Orthopaedics 2015; 39(11):2173-2180. IF 2.11 4. Savić V, Nikolić V, Arsić I, Stanojević Lj, Najman S, Stojanović S, Mladenović- Ranisavljević I. Comparative Study of the Biological Activity of Allantoin and Aqueous Extract of the Comfrey Root. Phytotherapy Research 2015; 29(8):1117-1122. IF 2.660 Б4. Радови објављени у међународним часописима М23 5. Najdanović J, Cvetković V, Stojanović S, Vukelić-Nikolić M, Stanisavljević M, Živković J, Najman S. The Influence of adipose-derived stem cells induced into endothelial cells on ectopic vasculogenesis and osteogenesis. Cellular and Molecular Bioengineering 2015; 8(4):577-590. IF 1.318 6. Rajković J, Stojanović S, Đorđević Lj, Cvetković T, Najman S. Locally applied cholecalciferol and alfacalcidol act differently on healing of femur defects filled with bone mineral matrix and platelet-rich plasma in ovariectomized rats. Biotechnology & Biotechnological Equipment 2015; 29(5):963-969. IF 0.379 7. Živković J, Najman S, Vukelić M, Stojanović S, Aleksić M, Stanisavljević M, Najdanović J. Osteogenic effect of inflammatory macrophages loaded onto mineral bone substitute in subcutaneous implants. Archives of biological sciences 2015; 67(1):173-186. IF 0.607 8. Damnjanovic I, Najman S, Stojanovic S, Stojanovic D, Veljkovic A, Kocic H, Langerholc T, Damnjanovic Z, Pesic S. Crosstalk between possible cytostatic and antiinflammatory potential of ketoprofen in the treatment of culture of colon and cervix cancer cell lines. Bratislavske Lekarske Listy 2015; 116(4):227-232. IF 0.446 9. Ilić D, Stojanović S, Najman S, Nikolić V, Stanojević Lj, Nikolić Lj. Biological evaluation of synthesized allicin and its transformation products obtained by microwaves in methanol: antioxidant activity and effect on cell growth. Biotechnology & Biotechnological Equipment 2015; 29(1):189-194. IF 0.379 10. Damnjanovic I, Kocic G, Najman S, Stojanovic S, Stojanovic D, Veljkovic A, Conic I, Langerholc T, Pesic S. Chemopreventive potential of alpha lipoic acid in the treatment of culture of colon and cervix cancer cell lines. Bratislavske Lekarske Listy 2014; 115(10):611-616. IF 0.446 11. Mitić Ž, Najman S, Cakić M, Ajduković Z, Ignjatović N, Nikolić R, Nikolić G, Stojanović ST, Vukelić M, Trajanović M. Spectroscopic characterization of bone tissue of experimental animals after glucocorticoid treatment and recovery period. Journal of Molecular Structure 2014; 1074:315 320. IF 1.602 12. Kostić I, Mihailović D, Najman S, Stojanović S, Kostić M. The rabbit gingival tissue response to retraction liquids and tetrahydrozoline. Vojnosanitetski Pregled 2014; 71(1): 46-51. IF 0.292 Б5. Радови објављени у научним часописима националног значаја - М52 1. Damnjanović I, Stojanović D, Kocić G, Najman S, Stojanović S, Pešić S. Farmakoterapijski aspekti primene alfa-lipoinske kiseline kao antioksidansa. Hrana i ishrana (Beograd). 2014; 55(2):48-53. 2. Kostić I, Najman S, Kostić M, Stojanović S. Comparative review of gingival retraction agents. Acta Medica Medianae. 2012; 51(1): 81-84. 4
Б6. Саопштења са међународних скупова штампана у целости - М33 1. Stojanović S, Mitić Ž, Miljković M, Rajković J, Trajanović M, Najman S. SEM-EDX Analysis of Bio-Oss Granules After Incubation In Cell Culture Medium. Proceedings of the III Advanced Ceramics and Applications Conference, Chapter 18, W.E. Lee et al. (eds.) Atlantis Press and the author(s) 2016:259-264. doi: 10.2991/978-94-6239-157-4 2. Mitić Ž, Stojanović S, Najman S, Cakić M, Ignjatović N, Uskoković D, Stolić A, Trajanović M. FTIR and SEM-EDX spectroscopic characterization of biomaterial calcium phosphate/poly-(dl-lactide-co-glycolide) under in vitro simulated physiological conditions. 12th International Conference on Fundamental and Applied Aspects of Physical Chemistry PHYSICAL CHEMISTRY 2014, Belgrade, Serbia, 22-26 September, 2014, Proceedings-Volume II, p. 518-521. 3. Golubović I, Baščarević Z, Trajanović M, Golubović Z, Stoiljković P, Najman S, Trenkić-Božinović M, Petrović S, Radovanović Z, Stojanović S, Stanisavljević M, Janjić M, Stojanović S, Stamenić S, Ćirić M. Application of Telemedicine in Treatment of Coxarthrosis Using Cementless Endoprosthesis of the Hip Joint With Fitmore Hip Stem. 6th International ICT Conference, Niš, Serbia, 14-16 October, 2014. Б7. Саопштења са међународних скупова штампана у изводу - М34 1. Stojanović S, Najman S, Korać A. Different adipogenic potential of mesenchymal stem cells isolated from lipoma and normal adipose tissue - a preliminary results. 4th International Symposium on Adipobiology and Adipopharmacology (ISAA), 28-31 October 2015, Bucharest, Romania. Abstracts published in Romanian Journal of Diabetes, Nutrition and Metabolic Diseases 22 (2015) / Supplement 2, pp. 68-69. 2. Najman S, Petrović D, Vučković I, Najdanović J, Cvetković V, Stojanović S, Živković J, Vukelić-Nikolić M, Petrović S, Mitić Ž, Trajanović M. From adipose tissue to the bone our experimental studies. 4th International Symposium on Adipobiology and Adipopharmacology (ISAA), 28-31 October 2015, Bucharest, Romania. Abstracts published in Romanian Journal of Diabetes, Nutrition and Metabolic Diseases 22 (2015) / Supplement 2, pp. 38-39. 3. Najman S, Đorđević Lj, Vasiljević P, Ćirić M, Vukelić-Nikolić M, Živković J, Stojanović S, Najdanović J, Rajković J, Cvetković V, Stanisavljević M, Vučković I, Golubović Z, Ajduković Z, Petrović D, Mitić Ž, Petrović S, Golubović I, Mihailović D, Trajanović M. Bone tissue engineering on experimental models. Advanced Ceramics and Applications IV, 21-23 September 2015, Belgrade, Serbia, Program and the Book of abstracts, pp. 86-87. 4. Rajković J, Najman S, Stojanović S, Đorđević Lj, Cvetković V, Ajduković Z. Early fracture healing in ovariectomized rats femur helped with alfacalcidol and platelet-rich plasma on Bio-Oss carrier. 13th Young Researchers Conference Materials Science and Engineering, Belgrade, Serbia, 10-12 December, 2014, Programme and the book of abstracts p.8. 5. Takić Miladinov D, Najdanović J, Tričković-Vukić D, Stojanović S, Tomić S, Vasiljević P, Najman S. Evaluation of genotoxicity of (meth)acrylate polymers in HeLa cells by using alkaline comet assay. 13th Young Researchers Conference Materials Science and Engineering, Belgrade, Serbia, 10-12 December, 2014, Programme and the book of abstracts (2014) p.10. 6. Damnjanović I, Kocić G, Najman S, Stojanović S, Veljković A, Pešić S. NF-kB as potential chemopreventive target of meloxicam in the treatment of colon cancer cells in 5
vitro. VI Serbian Congress of Pharmacy with international participation. Belgrade, Serbia, 15-19 October, 2014, Abstract Book p. 256-257. 7. Živković J, Najman S, Stojanović S, Stanisavljević M, Vukelić-Nikolić M, Najdanović J, Tričković-Vukić D. The effect of macrophages on initiation of osteogenesis in subcutaneous implants. The 33rd Balkan Medical Week, Bucharest, 8-11 October 2014. Archives of the Balkan Medical Union, Supplement I, A131 8. Najdanović J, Najman S, Cvetković V, Zivković J, Stojanović S, Stanisavljević M, Vukelić-Nikolić M, Živanov-Čurlis J. Neovasculogenic and osteogenic potential of adipose-derived stem cells implanted in combination with bone mineral matrix and platelet-rich plasma at ectopic site. The 33rd Balcan Medical Week. Bucharest, Romania, 8-11 October 2014. Archives of the Balkan Medical Union, Supplement I, A111 9. Cvetković V, Najman S, Najdanović J, Stanisavljević M, Vukelić-Nikolić M, Stojanović S, Rajković J. Histochemical analysis of in vivo osteogenic processes in constructs consisted of adipose-derived stem cells, platelet-rich plasma and bone mineral matrix. The 33rd Balcan Medical Week. Bucharest, Romania, 8-11 October 2014. Archives of the Balkan Medical Union, Supplement I, A93 10. Stojanović S, Najman S, Miljković M, Mitić Ž, Rajković J, Trajanović M. Analysis of the Surface of Bio-OSS Particles after Incubation in Cell Culture Medium using Scanning Electron Microscopy. The Third Serbian Ceramic Society Conference»Advanced Ceramics and Application III«Belgrade, Serbia, September 29 - October 1, 2014, Program and the Book of Abstracts, page 127. 11. Najman S, Vučković I, Petrović D, Petrović S, Živković J, Stojanović S. Osteogenic Potential of Adipose-derived Mesenchymal Stem cells applied with Bio-OSS as Carrier. The Third Serbian Ceramic Society Conference»Advanced Ceramics and Application III«Belgrade, Serbia, September 29 - October 1, 2014, Program and the Book of Abstracts, page 128. 12. Najdanović J, Cvetković V, Vukelić-Nikolić M, Živković J, Stojanović S, Najman S. Examination of in vitro neovasculogenic potential of mice adipose-derived stem cells. V Congress of the Serbian Genetic Society, Belgrade, Serbia, Sept 28 - Oct 02, 2014, Book of Abstracts p.94. 13. Cvetković V, Najdanović J, Vukelić-Nikolić M, Stanisavljević M, Rajković J, Živković J, Stojanović S, Najman S. Gene expression pattern of some bone-related markers in in vitro osteoinduced adipose-derived stem cells isolated from Balb/c mice. V Congress of the Serbian Genetic Society, Belgrade, Serbia, Sept 28 - Oct 02, 2014, Book of Abstracts p.105. 14. Stojanović S, Najman Stevo, Golubović Zoran, Stojanović Saša, Golubović Ivan, Petrović Slađana, Ćirić Milan. Osteogenic potential of adipose-derived mesenchymal stem cells in the case of osteoporosis. 53 rd Congress of Anthropological Society of Serbia with international participation, Vranje, Serbia, June 4-7, 2014, Programme and Abstracts, page 77. 15. Stojanović S, Stoiljković P, Golubović I, Najman S, Golubović Z, Stojanović S, Mihailović D, Stanisavljević M, Radovanović Z, Trenkić M, Petrović S, Ćirić M, Stevanović G, Trajanović M. ZMR prosthesis reimplantation after fracture of the endoprosthesis stem of the hip joint. 53 rd Congress of Anthropological Society of Serbia with international participation, Vranje, Serbia, June 4-7, 2014, Programme and Abstracts, page 101. 16. Golubović Z Golubović I Stojanović S, Stojanović S Stoiljković P, Mihailović D, Radovanović Z Trenkić M Petrović S Stoiljković D, Ćirić M, Stevanović G, Trajanović M. Osteosynthesis of patella after severe open fracture with bone loss. 53 rd Congress of 6
Anthropological Society of Serbia with international participation, Vranje, Serbia, June 4-7, 2014, Programme and Abstracts, page 102. 17. Stojanović S, Stoiljković P, Golubović I, Najman S, Golubović Z, Stojanović S, Ćirić M, Mihailović D, Stanisavljević M, Radovanović Z, Trenkić M, Petrović S, Stevanović G, Trajanović M. Reimplantation ZMR prosthesis after loosening components total hip endoprosthesis. 53 rd Congress of Anthropological Society of Serbia with international participation, Vranje, Serbia, June 4-7, 2014, Programme and Abstracts, page 104. 18. Hedrih A, Milosevic-Djordjevic O, Najman S, Stojanovic S. Spontaneous Chromosomal Instability Related to Aging and Gender. International Symposium of the German Society for Biochemistry and Molecular Biology Molecular Life Sciences 2013, Frankfurt am Main, Germany, October 3-6, 2013, Abstracts, page 46. 19. Stojanović S, Mitić Ž, Najman S, Miljković M, Ajduković Z, Ignjatović N, Uskoković D. SEM-EDS analysis of cobalt-substituted hydroxyapatite nanoparticles changes in culture medium in vitro. The Serbian Ceramic Society Conference»Advanced Ceramics and Application II«, Belgrade, Sept 30 - Oct 1, 2013, Program and The Book of Abstracts, page 50. 20. Mitić Ž, Stojanović S, Miljković M, Najman S, Ignjatović N, Uskoković D. SEM-EDS analysis of calcium phosphate/poly-(dl-lactide-co-glycolide) nanoparticles changes in culture medium in vitro. The Serbian Ceramic Society Conference»Advanced Ceramics and Application II«, Belgrade, Sept 30 - Oct 1, 2013, Program and The Book of Abstracts, page 50. 21. Stojanović S, Mitić Ž, Najman S, Ignjatović N, Uskoković D. Scanning electron microscopy study of changes in nanoparticles surface under in vitro simulated physiological conditions. Fifteenth annual conference YUCOMAT 2013, Herceg Novi, Montenegro, September 2-6, 2013, Programme and The Book of Abstracts, page 149. 22. Najman S, Petrović D, Vučković I, Živković J, Stojanović S, Ignjatović N, Uskoković D. Osteogenic potential of freshly isolated cells of adipose-derived mesenchymal fraction applied with nanoparticles. Fifteenth annual conference YUCOMAT 2013, Herceg Novi, Montenegro, September 2-6, 2013, Programme and The Book of Abstracts, page 45. 23. Najman S, Stojanović S, Vučković I, Petrović D, Najdanović J, Živković J, Vukelić M, Mitković M, Golubović Z, Mladenović D, Vasiljević P, Milovanović J, Trajanović M. Assisted regeneration of the human body - new strategies and technologies. 52 nd Congress of Anthropological Society of Serbia, Novi Sad, June 5-8, 2013, Programme and Abstracts, page 74. 24. Najman S, Stojanović S, Mitić Ž, Ajduković Z, Ignjatović N, Uskoković D. Examination of the influence of nanomaterials calcium phosphate/poly-(dl-lactide-coglycolide) and cobalt-exchanged hydroxyapatite on the viability of Saos-2 cells. 11 th Young Researchers Conference: Materials Science and Engineering, Belgrade, Serbia, December 3-5, 2012, Book of Abstracts, page 110. 25. Najman S, Najdanović J, Petrović D, Vučković I, Živković J, Stojanović S, Cvetković V, Vukelić M, Sekulović Lj, Djindjić B. Osteo-regenerative potential of adipose tissue derived mesenchymal stem cells. XXXII Balkan Medical Week, Nis, Serbia, September 21-23, 2012, Book of Abstracts. 26. Stojanović S, Najman S, Ajduković Z, Ignjatović N, D. Uskoković. Comparative study of the effects of different nanomaterials on the viability of human osteoblast-like cells. Fourteenth annual conference YUCOMAT 2012, Herceg Novi, September 3-7, 2012, Book of Abstracts, page 126. 7
27. Najman S, Stojanović S, Najdanović J, Živković J, Petrović D, Vučković I, Cvetković V, Sekulović Lj, Tričković-Vukić D, Vukelić M, Vasiljević P, Trajanović M. Adipose derived mesenchymal stem cells as a model for study of osteoinductive activity of bone substituting biomaterials. Fourteenth annual conference YUCOMAT 2012, Herceg Novi, September 3-7, 2012, Book of Abstracts, page 126. 28. Najman S, Stojanović S, Najdanović J, Ignjatović N, Uskoković D. Assessment of the effects of nanoparticles of CP/PLGA on cultures of different cell lines. Tenth Young Researchers' Conference "Materials Science and Engineering", Belgrade, Serbia, December 21-23, 2011, Book of Abstracts, page 6. 29. Kostić I, Mihailović D, Najman S, Stojanović S, Kostić M. The rabbit gingival tissue response to retraction liquids and tetrahydrozoline. Tenth Young Researchers' Conference "Materials Science and Engineering", Belgrade, Serbia, December 21-23, 2011, Book of Abstracts, page 8. 30. Stojanović S, Najman SJ, Najdanović J, Živković J, Najman SS, Ignjatović N, Uskoković D. Application of MTT viability test for biocompatibility examination of N- CP/DLPLG nanoparticles on cell cultures. The Ninth Students Meeting SM-2011 Processing and application of ceramics. Novi Sad, Serbia, November 16-18, 2011, Book of Abstracts, pages 66-67. 31. Milosevic V, Stojanovic S, Najman S, Miltojevic A, Randjelovic J, Najdanovic J. Effects of Chelidonium majus ethanolic extracts on viability and proliferation of different cell types in vitro. YES meeting, 6th Young European Scientist Meeting, Porto, Portugal, 16-18 September 2011. Int J Med Students 2012; 1(Suppl 1): Abstracts, p. 22. 32. Rajković J, Stojanović S, Najman S, Kostić M, Savić V. Propolis effect on morphology of human gingival fibroblasts in vitro. 10 th Multinational Congress on Microscopy. Scientific Campus, Urbino University Carlo Bo, Italy, September 4-9, 2011, Proceedings, pages 221-222. (*nagrada za najbolju poster prezentaciju u kategoriji prirodnih nauka) 33. Dodic N, Najdanovic J, Vukelic M, Zivkovic J, Stojanovic S, Stanisavljevic M, Stojiljkovic M, Najman S, Tomic S. The effect of the hydrogel poly(ethylene glycol) dimethacrylates on the viability and proliferation. 6th International Pirogov Scientific Medical Conference of Students and Young Scientists, Moscow, Russia, 24th March 2011, page 226. (*prva nagrada za poster prezentaciju u sesiji Medicinska nanobiotehnologija ) 34. Stojanović S, Najdanović J, Najman S. In vitro effects of Royal jelly on viability and proliferation of HeLa cells. IX th International Congress of Medical Sciences (ICMS), Sofia, Bulgaria, 13-16 May 2010, Abstract Book, page 55. 35. Najdanović J, Stojanović S, Živković P, Živković J, Vasiljević P, Najman S. In vitro osteogenic differentiation and phenotypisiation of mouse adipose tissue derived mesenchymal cells. IX th International Congress of Medical Sciences (ICMS), Sofia, Bulgaria, 13-16 May 2010, Abstract Book, page 57. (*druga nagrada za poster prezentaciju u kategoriji pretkliničkih istraživanja) Б8. Саопштења са скупова националног значаја штампана у изводу - М64 1. Savić V, Nikolić V, Nikolić Lj, Arsić I, Stanojević Lj, Tačić A, Stojanović S. Characterization of semisolid cream bases with the aqueous extract of comfrey root and allantoin by polarization microscopy. 11th Symposium with international participation Novel technologies and economic development, Leskovac, Serbia, October 23-24, 2015, Book of abstracts, p. 113. 8
2. Savić V, Nikolić V, Nikolić Lj, Stanojević Lj, Savić S, Petrović S, Stojanović S. The content of macro and microelements in the comfrey root aqueous extract. 11th Symposium with international participation Novel technologies and economic development, Leskovac, Serbia, October 23-24, 2015, Book of abstracts, p. 61. 3. Živković J, Stojanović S, Najdanović J, Tričković-Vukić D, Stanisavljević M, Vukelić M, Rajković J, Cvetković V, Živanov-Čurlis J, Najman S. Procena produkcije slobodnih radikala kiseonika u peritonealnim makrofagima miša semikvantitativnim mikroskopskim NBT testom. Drugi kongres SDMSRF Život sa slobodnim radikalima: Hemija, Biologija, Medicina, Niš, Srbija, 28. septembar, 2013, Knjiga sažetaka, str. 62. 4. Stojanović S, Ilić D, Najman S, Nikolić V, Stanković M, Savić V, Nikolić Lj. Efekat alicina i proizvoda njegove transformacije na vijabilnost i proliferaciju HeLa ćelija. IX Simpozijum Savremene tehnologije i privredni razvoj" sa međunarodnim učeščem, Leskovac, Srbija, Oktobar 21-22, 2011, Zbornik izvoda radova, strana 118. Б9. Ново техничко решење - М85 1. Dušica Ilić, Vesna Nikolić, Ljubiša Nikolić, Mihajlo Stanković, Stevo Najman, Ljiljana Stanojević, Sanja Stojanović. Metoda određivanja citotoksičnog (vijabilnog) i citostatičnog (proliferativnog) dejstva alil-disulfida, alicina i proizvoda transformacije alicina. Ev. br. 06-2067/1, od 21.12.2011. NIO realizator: Tehnološki fakultet, Leskovac. Б10. Студентски радови - М64 1. Dodić N, Stojanović S, Trajković D. Citohemijska procena osteogenog potencijala mezenhimskih ćelija masnog tkiva Balb/c miševa. 53. Kongres studenata biomedicinskih nauka Srbije sa međunarodnim učešćem, Kopaonik, Srbija, 26-30. april, 2012, Knjiga sažetaka, strana 209. 2. Stojanović S, Dodić N, Vukojičić P. Analiza efekata organskih rastvarača tipa alkohola na vijabilnost ćelija u kulturi. 53. Kongres studenata biomedicinskih nauka Srbije sa međunarodnim učešćem, Kopaonik, Srbija, 26-30. april, 2012, Knjiga sažetaka, strana 210. 3. Vukojičić P, Stojanović S. Karakteristike ektopične osteogeneze potpomognute hidroksiapatitnim biomaterijalom u kombinaciji sa mezenhimskim matičnim ćelijama na modelu supkutane implantacije mišu. 53. Kongres studenata biomedicinskih nauka Srbije sa međunarodnim učešćem, Kopaonik, Srbija, 26-30. april, 2012, Knjiga sažetaka, strana 212. 4. Ivković S, Nikolić N, Stojanović S. Uloga ćelija krvi u indukciji ektopične osteogeneze.52. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Budva, Crna Gora, 29. april 01. maj, 2011, Knjiga apstrakata, strana 61. 5. Stojiljković M, Stojanović S, Dodić N. Ispitivanje genotoksičnosti protetskih materijala na bazi metil-metakrilata mikronukleusnim testom in vitro. 52. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Budva, Crna Gora, 29. april 01. maj, 2011, Knjiga apstrakata, strana 65. 6. Stojanović S, Ivković S, Dodić N. Efekat matičnog mleča na proliferaciju MDCK ćelija u kulturi. 52. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Budva, Crna Gora, 29. april 01. maj, 2011, Knjiga apstrakata, strana 69. 7. Mladenović S, Stojanović S, Golubović I. Citotoksično delovanje Retrargina na MDCK ćelije. 52. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Budva, Crna Gora, 29. april 01. maj, 2011, Knjiga apstrakata, strana 71. 9
8. Nedić M, Stanojević M, Stojanović S. Delovanje protetskih biomaterijala na rast ćelija u kulturi. 51. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Ohridsko jezero, Srbija,23-27. april,2010, Zbornik radova, strana 25. 9. Stojanović S, Midić D, Skakić A. Uticaj propolisa na vijabilnost HeLa ćelija u kulturi, 51. Kongres studenata biomedicinskih nauka sa internacionalnim učešćem, Ohridsko jezero, Srbija, 23-27. april,2010, Zbornik radova, strana 27. 10. Skakić A, Janjić M, Stojanović S. In vitro efekti ekstrakata vrsta iz roda Calaminthae Miller na morfologiju HeLa S3 ćelija. 50. Kongres studenata biomedicinskih nauka, Lepenski Vir, Srbija, 30. april - 04. maj, 2009, Zbornik radova. В. Тема докторске дисертације: Наслов дисертације: Морфолошка и молекуларна карактеризација хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација и клиничких стања испитаника, и карактеризација изолованих мезенхимских ћелија in vitro Полазне основе: Масно ткиво је дуго описивано само као депо масти у организму. Данас се зна да је масно ткиво метаболички врло активно и да заправо представља веома важан ендокрини и паракрини орган који регулише функционисање многих ткива и органа. Масно ткиво секретује мноштво протеина који се једним именом могу назвати адипокини. То су адипонектин, лептин, резистин, проинфламаторни и антиинфламаторни цитокини и многи други. Сматра се да су ови молекули одговорни за одвијање многих процеса у организму. Масно ткиво је хистолошки веома хетерогено, састоји се од великог броја различитих типова ћелија као што су адипоцити, преадипоцити, ендотелне ћелије, перицити, фибробласти, мезенхимске матичне ћелије, мастоцити, лимфоцити, макрофаги и други (1). Поремећај нормалног функционисања масног ткива може довести до настанка различитих патолошких стања као што су гојазност, инсулинска резистенција, diabetes mellitus тип 2, кардиоваскуларне болести, тумори и многих других. Гојазност се описује као хронична инфламација масног ткива и представља врло озбиљан и тежак здравствени проблем данашњег времена који за последицу има негативан утицај на рад осталих органа у телу. Кардиоваскуларна обољења су поред малигних болести водећа по степену смртности, а инсулинска резистенција представља основу за развој diabetes mellitus типа 2. Сматра се да су за испољавање наведених болести одговорни, како продукти самих адипоцита, који чине главну ћелијску популацију масног ткива, тако и продукти других ћелија присутних у масном ткиву, као што су макрофаги. Присуство ових ћелија, као и секреторних продуката масног ткива варира у зависности од старости испитаника, пола, метаболичког статуса и исхране. Такође, висцерално масно ткиво се по неким својим карактеристикама и утицају на функционисање осталих органа разликује од поткожног масног ткива (2, 3, 4). Новија истраживања показују да су макрофаги главни актери у ремоделовању масног ткива и његовој дисфункцији и данас се њихова улога у овим процесима испитује у све већој мери. Тачан механизам њиховог деловања и њихова интеракција са адипоцитима и осталим ћелијама у масном ткиву још увек нису у потпуности разоткривени. Постоје два типа макрофага у масном ткиву, М1 (класично активирани) или проинфламаторни макрофаги, и М2 (алтернативно активирани), антиинфламаторни или репараторни макрофаги. Баланс између М1 и М2 макрофага у масном ткиву се битно одражава на хомеостазу ткива и промене у том балансу и њиховом неадекватном функционисању се повезују са настанком многих болести (5). 10
Мезенхимским матичним ћелијама (MSCs, engl. mesenchymal stem cells) изолованим из масног ткива се у данашње време посвећује све већа пажња у области ткивног инжењерства и регенеративне медицине. Ове ћелије су посебно атрактивне за наведену употребу због карактеристика које поседују и због тога што су лако доступне. То су мултипотентне ћелије које поседују способност самообнављања и могу се диферентовати у адипоците, остеобласте, хондроците, ендотелне ћелије и многе друге (6). Једноставним методима се могу изоловати из масног ткива које је у телу присутно у великој количини и лако доступно. По својим карактеристикама и потенцијалу врло су сличне MSCs из костне сржи, али се предност у примени MSCs из масног ткива огледа у доступности и минималним инвазивним хируршким техникама за добијање масног ткива. Показано је да MSCs из масног ткива поседују и имуномодулаторна својства и да се са старењем организма смањује њихов пролиферативни и диференцијациони потенцијал. Такође, постоје подаци о фенотипским разликама MSCs узетих са различитих анатомских локализација (7). Наведени подаци намећу питање у ком животном добу, здравственом стању и са које локализације је оправдано узети масно ткиво за примену MSCs. Липоми су бенигни тумори масног ткива који представљају најчешће туморе меких ткива. Могу се јавити у било ком периоду живота и независно од пола. Најчешћи су код људи средњих година, између 40 и 60 година живота, али се могу јавити и у ранијем периоду живота. Сматра се да један проценат свих људи у популацији има овај облик тумора меког ткива. У око 20% случајева липоми се јављају у пределу главе и врата, 1-4% у усној дупљи, а у осталим случајевима могу се јавити на различитим локализацијама и могу варирати у величини од једног до преко десет центиметара (8). Могу бити појединачни, што је најчешће случај, или се могу наћи у већем броју на различитим местима на телу. У литератури је описано неколико типова липома који се међусобно разликују по степену диферентованости ћелија и њиховом броју, као и по присуству различитих типова ћелија. Најчешће се јављају у поткожном масном ткиву, али могу бити и интрамускуларно, у телесним шупљинама и прикачени за унутрашње органе. Још увек се не зна тачан узрок настанка ових тумора и нема довољно података о њиховим карактеристикама. MSCs су присутне, како у нормалном масном ткиву, тако и у туморима масног ткива и сматрају се одговорним за развој ових тумора. Неколико истраживачких група показало је да ове ћелије имају сличне карактеристике као и MSCs из нормалног масног ткива, да поседују специфичне маркере за MSCs и да се могу диферентовати у адипоците, остеобласте и хондроците (9, 10). Такође, постоје студије у којима је показано да се експресија специфичних маркера пролиферације и диференцијације у липому и нормалном масном ткиву разликује (8), па се намеће питање у којим су све карактеристикама и у којој мери ове ћелије заиста сличне. Предмет докторске дисертације: Иако су истраживања у области биологије масног ткива све више актуелна, још увек се не зна довољно о начинима како дисфункција масног ткива утиче на испољавање одређених болести. Постоје подаци о секреторним продуктима масног ткива и о томе да се њихова експресија разликује у зависности од локализације, старости, пола и исхране, али недостају поуздана објашњења о повезаности одређених молекуларних профила масног ткива са здравственим стањем организма. Ова отворена питања су била мотив да предмет једног дела ове докторске дисертације буде испитивање морфолошких и молекуларних карактеристика хуманог масног ткива различитих анатомских локализација и у различитим клиничким стањима испитаника као и различите старосне доби, оба пола. У области регенеративне медицине, познато је да MSCs из масног ткива имају потенцијал пролиферације, самообнављања и диференцијације у одређене типове ћелија као што су адипоцити, остеобласти и хондроцити. Ипак, још увек није у потпуности 11
разјашњено са које анатомске локализације треба узети ове ћелије како би се постигао што бољи резултат у погледу њиховог регенеративног потенцијала због података о различитим карактеристикама ових ћелија. Стога је предмет другог дела ове докторске дисертације in vitro испитивање молекуларних, пролиферативних и диференцијационих карактеристика изолованих мезенхимских ћелија из масног ткива узетог са различитих анатомских локализација испитаника, у различитим клиничким стањима, оба пола и различитих старости, као и њихових имуномодулаторних својстава. Липоми су најчешћи тумори масног ткива који, иако су бенигни и не угрожавају живот пацијента, могу представљати велики естетски проблем, а уколико крене њихова убрзана експанзија и уколико се налазе у близини појединих органа, могу ометати нормално функционисање тих органа. Данас се липоми уклањају хируршким путем, без компликација, са врло малим процентом рецидива. Још увек је непозната тачна етиопатогенеза липома и молекуларни механизми који леже у основи настанка ових бенигних тумора масног ткива. Предмет трећег дела ове докторске дисертације биће морфолошка и молекуларна карактеризација липома различитих анатомских локализација и у различитим клиничким стањима испитаника, оба пола. Постоје оскудни подаци о молекуларним, пролиферативним и диференцијационим карактеристикама MSCs из липома и разликама у односу на MSCs из нормалног масног ткива. Малобројни подаци о разликама ове две популације MSCs изгледају контрадикторно када се сагледавају механизми пролиферације и диференцијације у контексту других карактеристика ових ткива. Зато је предмет четвртог дела ове докторске дисертације in vitro испитивање молекуларних, пролиферативних и диференцијационих карактеристика изолованих мезенхимских матичних ћелија из липома, узетих са различитих анатомских локализација испитаника, у различитим клиничким стањима, оба пола, као и њихових имуномодулаторних својстава, и поређење са MSCs изолованим из нормалног масног ткива. Научни циљ докторске дисертације: Научни циљеви ове дисертације су: испитивање морфолошких и молекуларних карактеристика узорака хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација, у различитим клиничким стањима и старосној доби испитаника оба пола, применом хистолошких, хистоморфометријских, ултраструктурних, имунохистохемијских метода и анализом експресије гена. изолација MSCs из узорака хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација, у различитим клиничким стањима и старосној доби испитаника оба пола и њихова карактеризација: - применом метода in vitro култивације и експанзије ћелија, - фенотипизацијом ћелија проточном цитометријом и имуноцитохемијом, - испитивањем пролиферативног капацитета ћелија, - испитивањем диференцијационог потенцијала ћелија у адипогеном и остеогеном медијуму, - проценом степена диферентованости анализом генске експресије, цитохемијским и имуноцитохемијским методима, - испитивањем имуномодулаторних карактеристика индиректном кокултуром са макрофагима. компарација карактеристика испитиваних ткива и изолованих ћелија дескриптивним и статистичким методима: 12
- узетих са различитих анатомских локализација - различитих клиничких стања - различите старосне доби Материјал и методи: Узорковање ткива Хумано масно ткиво ће бити узимано биопсијом са линије хируршког реза у току хируршке интервенције код пацијената који се лече на некој од хируршких клиника Клиничког Центра у Нишу, а део тумора масног ткива (липома) са оперативног препарата који је уклоњен из тела пацијента. Подаци о пацијентима биће узимани из историје болести или попуњавањем упитника. Ткиво ће се узимати са различитих анатомских локализација, пацијената старости од 18 до 75 година, оба пола. Узорци ткива биће подељени у неколико група и подгрупа у односу на клиничку слику пацијената. Истраживање је одобрено од стране Етичке комисије Медицинског факултета Универзитета у Нишу (Ев. број 01-6481-15). Хистолошка анализа ткива Део узорака масног ткива и липома биће фиксиран у неутралном пуферисаном формалину, укалупљен у парафинске блокове, сечен на микротому и биће рађена стандардна хистолошка бојења хематоксилин-еозин и толуидин плаво. Хистоморфометријска анализа ткива На обојеним препаратима масног ткива и липома биће одређиване величина и број адипоцита и васкуларизација ткива мерењем површине крвних судова у програму за хистоморфометријску анализу ткива. Ултраструктурна анализа ткива Део узорака масног ткива и липома биће фиксиран у глутералдехиду и укалупљен у смоле за анализу ткива на трансмисионом електронском микроскопу. Имунохистохемијска анализа ткива Присуство одређених типова ћелија и протеина у узорцима ткива биће одређивано имунохистохемијским бојењима, применом специфичних антитела: - маркера апоптозе и пролиферације ћелија - маркера одређених ћелијских популација - маркера одређених секреторних продуката, протеина ванћелијског матрикса и унутарћелијских протеина - маркерима васкуларизације и диференцијације масног ткива - маркерима макрофага М1 и М2 поларизованог стања За детекцију позитивне реакције везивања антитела за специфичне протеине на препаратима ткива користиће се ДАБ систем за визуелизацију. Анализа експресије гена У циљу анализе експресије специфичних гена у масном ткиву и липомима, из ткива ће се најпре изоловати укупна РНК а затим ће се изолована РНК превести у комплементарну ДНК методом реверзне транскрипције. Анализа релативне експресије одређених гена вршиће се методом ланчане полимеразне реакције у реалном времену. 13
Физичкохемијска анализа ткива Инструменталним методима хемијске анализе и биохемијским методима анализираће се садржај укупних протеина и липида у масном ткиву и липомима. Изолација мезенхимских матичних ћелија (MSCs) Стромална васкуларна фракција (СВФ) масног ткива и липома ће бити изолована методом ензимске дигестије масног ткива и липома. Мезенхимске матичне ћелије ће бити добијене пречишћавањем СВФ култивацијом у стандардним in vitro условима, применом одговарајућих медијума. Карактеризација мезенхимских матичних ћелија (MSCs) из узорака масног ткива и липома Вршиће се карактеризација изолованих MSCs следећим методима: - фазно-контрастном микроскопијом, методама цитохемијског и имуноцитохемијског бојења, проточном цитометријом, применом специфичних антитела позитивних и негативних маркера матичних ћелија, анализом генске експресије у ћелијама након пречишћавања у култури, - испитивањем способности пролиферације ћелија (анализом ћелија у реалном времену, тестовима пролиферације, клоногеним есејем) и способности диференцијације MSCs у остеобласте и адипоците култивацијом ћелија у остеогеном и адипогеном медијуму. Степен остеогене диференцијације ће се процењивати применом фазно-контрастне микроскопије, цитохемијским и имуноцитохемијским бојењима, анализом генске експресије, одређивањем продуката секреције диферентованих ћелија. Као позитивна контрола користиће се ћелијска линија хуманих остеобласта. Степен адипогене диференцијације ће се процењивати применом метода фазно-контрастне микроскопије, цитохемијским и имуноцитохемијским бојењима, анализом генске експресије. - испитивањем имуномодулаторних својстава MSCs из масног ткива и липома у индиректној ко-култури са макрофагима. Процена ефекта вршиће се тестовима фагоцитозе, вијабилности макрофага, анализом ћелија у реалном времену, имуноцитохемијским бојењима макрофага и одређивањем специфичних секреторних продуката макрофага. Статистичка анализа Резултати добијени наведеним методима биће статистички обрађени одговарајућим статистичким тестовима у складу са примењеним методима. Најважнији литературни подаци који подржавају тему (до 10 референци): 1. Sun K, Kusminski CM, Scherer PE. Adipose tissue remodeling and obesity. J Clin Invest 2011; 121(6): 2094 2101. 2. Viguerie N, Montastier E, Maoret J-J, Roussel B, Combes M, et al. Determinants of Human Adipose Tissue Gene Expression: Impact of Diet, Sex, Metabolic Status, and Cis Genetic Regulation. PLoS Genet 2012; 8(9):e1002959. 3. Iglesias MJ, Eiras S, Piñeiro R, López-Otero D, Gallego R, Fernández AL, Lago F, González- Juanatey JR. Gender differences in adiponectin and leptin expression in epicardial and subcutaneous adipose tissue. Findings in patients undergoing cardiac surgery. Rev Esp Cardiol. 2006; 59(12):1252-60. 4. Jankovic A, Korac A, Srdic-Galic B, Buzadzic B, Otasevic V, Stancic A, Vucetic M, Markelic M, Velickovic K, Golic I, Korac B. Differences in the redox status of human visceral and subcutaneous 14
adipose tissues - relationships to obesity and metabolic risk. Metabolism. 2014; 63(5):661-71. 5. Suganami T, Ogawa Y. Adipose tissue macrophages: their role in adipose tissue remodeling. J Leukoc Biol 2010; 88: 33 39. 6. Gimble JM, Katz AJ, Bunnell BA. Adipose-derived stem cells for regenerative medicine. Circ Res. 2007; 100(9):1249-60. 7. Jung S, Kleineidam B, Kleinheinz J. Regenerative potential of human adipose-derived stromal cells of various origins. J Craniomaxillofac Surg. 2015; 43(10):2144-51. 8. Zavan B, De Francesco F, D'Andrea F, Ferroni L, Gardin C, Salzillo R, Nicoletti G, Ferraro GA. Persistence of CD34 Stem Marker in Human Lipoma: Searching for Cancer Stem Cells. Int J Biol Sci. 2015; 11(10):1127-39. 9. Suga H, Eto H, Inoue K, Aoi N, Kato H, Araki J, Higashino T, Yoshimura K. Cellular and molecular features of lipoma tissue: comparison with normal adipose tissue. Br J Dermatol. 2009; 161(4):819-25. 10. Lin TM, Chang HW, Wang KH, Kao AP, Chang CC, Wen CH, Lai CS, Lin SD. Isolation and identification of mesenchymal stem cells from human lipoma tissue. Biochem Biophys Res Commun. 2007; 361(4):883-9. Г. Закључак и предлог: На основу прегледа приложене пријаве за израду докторске дисертације, увида у стање истраживања у областима којима припада предложена тема докторске дисертације, као и праћења досадашњег рада кандидата, Комисија сматра да Сања Т. Стојановић у потпуности испуњава услове за отпочињање израде предложене докторске дисертације. Комисија закључује да је предложена тема докторске дисертације Сање Стојановић: из научне области која је изузетно актуелна, да ће се радити разноврсним и врло савременим биолошким методама и да резултати предложених истраживања могу представљати вредне научне чињенице од фундаменеталног и практичног значаја. Све расположиве и изнете чињенице указују да је предложена тема дисертације научно заснована и зато Комисија са задовољством предлаже Научно-наставном већу Биолошког факултета Универзитета у Београду да је прихвати под измењеним насловом: Морфолошка и молекуларна карактеризација хуманог масног ткива и липома различитих анатомских локализација и испитивање изолованих мезенхимских ћелија in vitro. Београд, 28.06.2016. године Комисија: др Стево Најман, редовни професор, Медицински факултет Универзитета у Нишу др Александра Кораћ, редовни професор, Универзитет у Београду-Биолошки факултет др Бато Кораћ, ванредни професор, Универзитет у Београду-Биолошки факултет 15